傳代培養操作步驟：
一、貼壁培養
細胞傳代培養操作步驟如下：
（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。
（2）吸掉或倒掉培養瓶內的培養液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。
（3）根據培養瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養瓶底。
（4）把培養瓶放入37℃ CO2培養箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。
（5）吸出所有細胞懸液至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。
（6）棄上清，加入適量培養液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。
（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養瓶中，補足培養液，搖勻，放置于37℃ CO2培養箱中進行培養。
（8）根據細胞生長狀態確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。
小鼠結腸黏膜上皮細胞永生化
細胞基本屬性：
產品名稱 | 小鼠結腸黏膜上皮細胞永生化（免疫熒光鑒定） | 組織來源 | 正常結腸組織 |
種屬 | 小鼠 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞代數 | 10代以內 | 細胞形態 | 鋪路石狀細胞，不規則細胞 |
| 支原體檢測 | 無 | 凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲存 |
細胞詳細介紹：
背景簡介;結腸在右髂窩內續于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部，大部分固定于腹后壁，結腸的排列酷似英文字母“M"，將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為：粘膜（上皮層，固有層，粘膜肌層），粘膜下層，肌層，外膜。結腸黏膜上皮在環境或遺傳等多種致癌因素作用下導致結腸癌，是常見的惡性腫瘤之一。因此，體外培養結腸黏膜上皮細胞為研究進一步結腸癌等疾病提供了前提和基礎。該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶SV40基因。 細胞鑒定;細胞角蛋白-18（CK-18）免疫熒光染色為陽性，純度高于90% 細胞規格;1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝 支原體檢測;無 培養基;小鼠結腸黏膜上皮細胞永生化細胞專用培養基（DMEM/F12K+10%FBS+PS) 培養條件;氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ 凍存條件無血清凍存液，液氮儲 發貨方式復蘇發貨（免運輸費用）/ 凍存發貨（需加干冰運輸費用） 順豐快遞 供應限制僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 特別說明以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 |
二、懸浮細胞
傳代培養操作步驟如下：
一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。
（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發生污染。
（2）所用培養液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養液。
（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用?？筛鶕墨I或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。
（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數量和實驗進度。
（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數量不夠，或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。
（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產生，以免損傷細胞，影響細胞狀態（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生）。
公司正在出售的產品：
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ELISA 小鼠粒細胞集落刺激因子(mouse G-CSF) 48T/96T 進口分裝
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腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體抗體
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肉毒堿棕櫚酰基轉移酶1A抗體
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線粒體二羧酸載體蛋白20抗體
白細胞介素1受體相關激酶1結合蛋白1抗體
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小鼠結腸黏膜上皮細胞永生化血小板源性生長因子受體A/PDGFRα抗體
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