PANC 05.04人胰腺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 豚鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml

FRAT1： 原癌基因FRAT1抗體 RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 Rattus

HPASMC-c 人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(HPASMC) 500,000cells 心肌成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 豚鼠白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml

FOXD1： 叉頭蛋白D1抗體 CM-H080人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

YAC-1(小鼠淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 豚鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.5ml

Midnolin： 中腦核仁蛋白抗體 IL13RA2 Others Mouse 小鼠 IL13RA2 / CD213A2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

NSC，大鼠神經(jīng)干細(xì)胞 大鼠胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)ELISA試劑盒 Mouse angiotension II ,ANG- II  小鼠血管緊張素Ⅱ 96T

MYH7B： 肌球蛋白重鏈7抗體 BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1

NCI-H226(人肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 VERO C1008 (E6)(非洲綠猴腎細(xì)胞) 大鼠胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)ELISA試劑盒 ACE II  大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶 96T

MYOM1： 肌間蛋白1抗體 兔間變表皮鱗癌瘤株;VX2

PANC 05.04人胰腺癌細(xì)胞 HBQ1： 血紅蛋白theta亞型1抗體 CL-0066COLO 205(人結(jié)腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Y79細(xì)胞，人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤 球毛殼霉 小鼠肺腺癌細(xì)胞系;LA795 人鈣調(diào)0酸酶(CaN)ELISA 試劑盒 EGFL7(EGF-like domain containing protein 7) 類表皮生長(zhǎng)因子域7抗原 0.5mg

HBS1L： hbs1樣蛋白抗體 MMP2 Others Human 人 MMP-2 / CLG4A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

盤羊皮膚細(xì)胞;ASHS2 人鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)ELISA 試劑盒 Egr-1(Early growth response 1) 早期反應(yīng)基因-1/應(yīng)急反應(yīng)生長(zhǎng)基因1抗原 0.5mg

HCAP G： 縮素復(fù)合物亞型蛋白3抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞(拉祜族);KM9406