SK-N-SH人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FNDC3B： Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白3B抗體 ACHE Others Mouse 小鼠 AcetylCHOlinesterase / ACHE 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0464USMC(大鼠血管平滑肌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 兔兒茶酚胺(CA)ELISA 試劑盒 Goat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml

FUS： 粘液樣脂肪肉瘤蛋白FUS1抗體 SF9, 昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞 其它

hMSC-AT-c 人類脂肪組織間質(zhì)干細(xì)胞(hMSC-AT) 500,000cells 小鼠背脊髓神經(jīng)元MN-dsc 兔超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA 試劑盒 Goat Anti-Guinea IgG/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml

FOLH1B： 細(xì)胞生長(zhǎng)抑制蛋白26/前列腺特異性膜抗原樣蛋白抗體 家貓皮膚細(xì)胞;FCA-S1

Phospho-MEK1/2 (Ser218 + Ser222)： 0酸化原活化蛋白激酶激酶1/2抗體 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-4D6

Psi2 DAP(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 AAV-293( 胚腎細(xì)胞) 大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒 APC  大鼠活化蛋白C 96T

Phospho-Met (c-Met) (Tyr1003)： 0酸化肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體 小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Fox-NY

IL36RN Protein Human 重組人 IL1F5 / IL36RN 蛋白 大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA 試劑盒 SCF/MGF(Human Stem cell factor/mast cell growth factor)  人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子 96T

Phospho-Met (Tyr1234 + Tyr1235)： 0酸化肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(原癌基因)抗體 SDF2 Others Mouse 小鼠 SDF2 / SDF-2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

SK-N-SH人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞OS-RC-2(人腎癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人補(bǔ)體1q(C1q)ELISA 試劑盒 LIS1(Lissencephaly-1 protein) 無(wú)腦回的致病基因LIS1抗原 0.5mg

IEX1： 分化相關(guān)基因2蛋白/立即早期反應(yīng)蛋白抗體 人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞HOMEC

FAM19A2 Protein Human 重組人 FAM19A2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) 人玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA 試劑盒 LFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein) 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原 0.5mg

ICAM4： 細(xì)胞間粘附分子4抗體 HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人波形蛋白(VIM)ELISA 試劑盒 LFABP/FABP-2(Liver Fatty acid binding protein) 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原 0.5mg

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。