大鼠β防御素（β-Defensin）ELISA Kit試劑配制:

　　1、 標(biāo)準(zhǔn)品

　　(1) 從試劑盒中取出一支標(biāo)準(zhǔn)品，于6000-10000rpm 離心30 秒。用1ml 樣本稀釋液溶解，并用吸頭對(duì)準(zhǔn)凍存管底部反復(fù)吸打5 次以助溶解，充分混勻得到標(biāo)準(zhǔn)品S7，放置備用。

　　(2) 取7 個(gè)1.5 ml 離心管(S0-S6)依次排列，各加入250μl 樣本稀釋液。吸取250μl 標(biāo)準(zhǔn)品S7 到*個(gè)離心管中(S6)，輕輕吹打混勻。從S6 中吸取250μl 到第二個(gè)EP 管中(S5)，輕輕吹打混勻。以此類推進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品的倍比稀釋。S0 為樣本稀釋液。

　　2、 洗液工作液濃洗滌液按1:25倍用去離子水進(jìn)行稀釋。例如用量筒量取240ml去離子水，倒入燒杯或其他潔凈容器中，再量取10ml濃洗滌液，均勻加入，攪拌混勻，在臨用前配妥。濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。

　　3、 生物素標(biāo)記抗體工作液生物素標(biāo)記抗體液按1:100倍用生物素標(biāo)記抗體稀釋液進(jìn)行稀釋。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液，輕輕混勻，在臨用qian10分鐘內(nèi)配妥。

　　4、 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素按1:100倍用辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液進(jìn)行稀釋。如10μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液，輕輕混勻，在臨用qian10分鐘內(nèi)配妥。

elisa試劑盒結(jié)果判斷與分析

1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的待測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的待測(cè)物質(zhì)含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

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