大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線：
1 錯(cuò)誤的方法重懸標(biāo)準(zhǔn)品 加入正確量的溶液重懸標(biāo)準(zhǔn)品，重懸充分
2 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋錯(cuò)誤 按照說明書要求稀釋標(biāo)準(zhǔn)品
3 標(biāo)準(zhǔn)品污染 使用一次性的滅菌吸頭， 標(biāo)準(zhǔn)品貯存于2-8 ℃
4 錯(cuò)誤的倍比稀釋步驟 按照說明書倍比稀釋標(biāo)準(zhǔn)品
5 波長選擇錯(cuò)誤TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用，而 前者比色波長為450nm，后者為492nm。雙波長比色分析優(yōu)于單波長。
6 標(biāo)準(zhǔn)品混用 不同批號試劑勿混用
7 試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長，溫度太高，標(biāo)準(zhǔn)品失活 盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間，夏季應(yīng)放冰塊降溫
8 ELISA未終止而直接檢測450nm和620nmTMB顯色需終止后檢測，否則會出現(xiàn)620nm比450nm讀數(shù)高的現(xiàn)象。
結(jié)果判斷與分析：
1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度, 再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
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